U hemiji, biologiji i medicini, pipeta je tipičan laboratorijski instrument koji se koristi za isporuku unaprijed određene količine tekućine, često kao dozator medija. Uspjeh rezultata pipetiranja ovisi o tome koliko precizno čitate zapreminu pipete prilikom izvođenja delikatnih studija. Korištenje preciznih, visokokvalitetnih instrumenata je najbolji način da se osigura da se količine pipete ispravno očitaju. Kako se zahtjevi laboratorija za preciznošću i preciznošću nastavljaju povećavati, razumijevanje i usavršavanje idealnih tehnika pipetiranja je od ključnog značaja.
Pipete se koriste u naučnim istraživanjima i zahtevaju visoku preciznost za pravilno merenje i prenos malih količina tečnosti.
Međutim, kvar opreme ili greška operatera mogu biti uzrok grešaka u mjerenju pipete. Sve promjene u doziranom volumenu mogu imati utjecaj na rezultate i ponovljivost eksperimenata, kao što su oni qPCR.
Faktori koji utiču na tačnost pipete:
Temperatura
Na precizno pipetiranje u velikoj mjeri utiče temperatura. Temperaturna razlika između uređaja za isporuku i tečnosti je najutjecajniji faktor. Specifični efekti termičkog širenja javljaju se u vazdušnom prostoru (volumen mrtvog vazduha) između površine tečnosti i klipa. Između ostalih posljedica, ovo može smanjiti ili povećati količinu tekućine koja se uvlači u vrh.
Gustina
Na količinu tečnosti koja se uvlači u vrh utiče gustina (odnos masa/volumen). Aspirira se manje gušća tekućina nego sličan postupak korištenjem vode. Za manje guste tečnosti, rezultati su suprotni. Ovo je uzrokovano fleksibilnim volumenom mrtvog zraka i Zemljinom gravitacijom. Gustina tečnosti se takođe menja sa temperaturom. Tipično, gustina tečnosti se takođe menja sa temperaturom. Na 20 stepen /68 stepeni F, voda obično ima gustinu od 0.998 kg/dm3, etanol ima gustinu od 0,79 kg/dm3, a sumporna kiselina (95-98% h2SO4) ima gustinu od 1,84 kg/dm3.
Visoko
Na preciznost utiču vazdušni pritisak i geografska visina. Što je visina veća, to je niži vazdušni pritisak i niži faktor konverzije.
Osim toga, tačke ključanja nekih tekućina značajno padaju na temperaturu blizu sobne, čime se značajno povećavaju gubici isparavanjem.
Isparavanje reagensa
Veoma isparljivi reagensi apsorbuju paru koja ulazi u vrh i podiže unutrašnji pritisak. Stoga dolazi do grešaka kada se tečnost istiskuje zbog povećanog pritiska.
Odabran je pogrešan način pipetiranja
Tokom pipetiranja, operateri često donose nasumične ili subjektivne odluke o tome da li da koriste način rada unazad ili naprijed. Međutim, viskozni uzorci bi trebali biti jedini koji koriste reverzni način rada. U reverznom načinu rada, klip je potpuno pritisnut (preko prvog graničnika) da bi se aspirirao uzorak, a zatim samo djelomično pritisnut (do prvog graničnika) da bi se uzorak isporučio. Prema tome, korištenje načina rada naprijed s viskoznim tekućinama će rezultirati nedostatkom isporuke, dok će korištenje obrnutog načina rada s vodenim otopinama rezultirati prekomjernom isporukom.
Nagibno pipetiranje
Gubitak uzorka nastaje kada vrh pipete dođe u kontakt sa zidom posude tokom aspiracije. Osim toga, kada pipetirate male količine, povlačenje pipete pod uglom može uzrokovati promjene volumena zbog efekata površinske napetosti. Izvlačenje pipete direktno iz posude smanjuje greške.