U eksperimentima u ćelijama, pipeti se često koriste, a tačnost njihove operacije izravno utječe na pouzdanost i ponovljivost eksperimentalnih rezultata. Slede su neki savjeti za operaciju pipete u ćelijskoj kulturi, za koju nadam se da će vam biti korisno za vaš eksperiment.
1. Odaberite pravu pipetu i savjet
- Odabir pipete: Odaberite pravu pipetu prema količini tečnosti za prenos. Normalni opseg radnog jačine zvuka većine pipeta je 10-100% naznačenog raspona. Pokušajte izbjeći podešavanje glasnoće pipete na manje od 10% maksimalne zapremine i koristite pipetu za male dosega za operacije pipetiranja malih jačine zvuka.
- Odabir savjeta: Odaberite savjet koji odgovara pipeti i provjerite je li vrh čvrsto umetnut kako biste izbjegli curenje zraka. Pored toga, za posebne eksperimente (poput aseptičke operacije) treba odabrati autoklavene savjete.
2. Isperite savjet
Isperite tipov 2-3 puta da formirate homogen film u savjetima, poboljšavajući točnost pipetiranja. Pored toga, može neutralizirati kapilarni učinak u mikropipete, što može napraviti temperaturu unutar vrha u skladu s temperaturom uzorka za cijepanje velike količine. Treba napomenuti da ispiranje može imati negativan učinak na rezultate kada pipetiranje vrućih i hladnih rješenja.
3. Kontrolišite brzinu težnje i izdavanja
- Glatko prešanje: Pritisnite i pustite kontrolni gumb glatko i neprekidno, a ne pritiskom i oslobađanjem iznenada. To može izbjeći formiranje mjehurića i poboljšati tačnost pipetiranja.
- Pauza: Nakon tećivanja tečnosti, napustite vrh u tečnost oko 1 sekundu, posebno za one viskozne tečnosti. Odmah izvlačenje vrha može rezultirati nepotpunom tečnom težnom.
4. Obratite pažnju na uranjanje dubine vrha
- Mikropipette: Savjet bi trebao biti uronjen 2-3 mm.
- Pipeta velikog dometa: dubina uranjanja treba biti 5-6 mm. Ako se vrh uronjeno previše duboko, zrak unutar vrha bit će komprimiran, uzrokujući da se teže tekućina. Preostalo tečnosti na površini vrha može uticati i na rezultate.
5 Vertikalna operacija
Uronite pipetu u uzorku što je vertikalno moguće, po mogućnosti, a da ne odstupa iz vertikalnog položaja za više od 20 stepeni. Pored poboljšanja tačnosti jačine pipete, to može spriječiti i tečnost da teče u pipetu zbog prekomjernog naginjanja.
6. Pridržavajte se vrha pipete
Priprema za praznjenje tečnosti obratite pažnju na to da li postoje višak kapljica pričvršćenih na površinu vrha pipete. Nakon otpuštanja tečnosti, vrh pipete može se dodirnuti na stranu spremnika kako bi se osiguralo da je pražnjenje dovoljno temeljno da se spriječi zadnju padu tekućine od preostalog na vrhu cijevi pipete.
7. Odaberite odgovarajuću metodu pipetiranja
- Pozitivna metoda usisavanja: Pogodno za većinu tečnosti. Prilikom sisanja tekućine pritisnite tipku na prvo mjesto za zaustavljanje, a zatim polako otpustite gumb da biste se vratili na početnu točku. Zatim pritisnite tipku na prvo mjesto za zaustavljanje da biste izvršili tečnost, pauzirajte na neko vrijeme i nastavite pritisnuti tipku na drugo zaustavljanje da biste ispuhali preostalu tečnost. Na kraju otpustite dugme.
- Način usisavanja: pogodna za visoko viskozne tečnosti, biološki aktivne tečnosti, lako pjenjenje tečnosti ili izuzetno male količine tečnosti. Prvo sisanje u više tekućih od set raspona i ne puhajte preostalu tečnost prilikom prenošenja tečnosti.
8. Držite pipetu čistu i održavanu
- Redovna kalibracija: Nakon korištenja pipete u određenom vremenskom periodu, to treba kalibrirati kako bi se osigurala njegova tačnost.
- Čišćenje: Nakon svake upotrebe, pipette treba čistiti na vrijeme kako bi se izbjegla preostala tečnost da kontaminira sljedećeg eksperimenta.
9. Aseptična operacija
U staničnoj kulturi, aseptički rad je vrlo važan. Kada koristite pipetu, obratite pažnju na sljedeće tačke:
- Dezinfekcija: Prije upotrebe obrišite pipetu i vrh sa pamučnom kuglicom za dezinfekciju.
- Izbjegavajte unakrsnu kontaminaciju: Koristite novi savjet za svaki uzorak kako biste izbjegli unakrsnu kontaminaciju.
S gornjim savjetima možete koristiti pipete za eksperimente ćelijske kulture preciznije i efikasnije i poboljšati pouzdanost i ponovljivost eksperimentalnih rezultata. Nadam se da će vam ovi savjeti pomoći!